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影响聚丙烯酰胺凝胶电泳使用效果的几种因素

2017-07-19 09:01:46 巩义市益达滤材有限公司 阅读

影响聚丙烯酰胺凝胶电泳使用效果的几种要素:

1、化学降解

    化学降解是指聚合物溶液短期或长时刻与一些物质(如氧气)触摸,该物质损坏聚合物分子构造的进程。依据降解机理的不一样,化学降解首要有氧化降解和光降解。

2、氧化降解 

    聚丙烯酰胺凝胶电泳的氧化降解首要为自由基传递反响。氧化反响导致聚丙烯酰胺凝胶电泳主链的开裂,使聚合物分子量削减。氧化降解反响具有自由基连锁反响的特征,过氧化物、还原性有机杂质以及过渡金属离子等起着活化剂效果,产生活性自由基碎片,大大降低了聚合物降解进程中分化反响活化能,促进聚合物氧化降解。

    溶液中氧气的存在是聚丙烯酰胺凝胶电泳氧化降解的重要要素,当溶液中缺氧时,容易发作分子链的巧合,生成交联构造,链完结;当溶液中有满足的氧时,则容易发作氧化降解反响。研讨不一样条件下聚丙烯酰胺凝胶电泳在水溶液中的化学降解效果,在氧存在时,聚丙烯酰胺凝胶电泳溶液的安稳性降低,溶液粘度的降低随温度添加而加重,相反,在脱氧条件下,溶液粘度发作细微的上升,并测得聚丙烯酰胺凝胶电泳在水溶液中的氧化降解反响活化能为38kJ/mol。在空气和氧气不一样条件下,二者降解差别不大,标明在空气存在时,水溶液中溶解氧的含量已满足使水解聚丙烯酰胺发作很多的氧化降解,不管在不一样温度或许不一样氧含量条件下,均不呈现寻常氧化降解前期的诱导景象。

3、光降解  

    现有的研讨标明,自然光和紫外线照耀能够直接使聚丙烯酰胺凝胶电泳降解。用不一样的天然水制造聚丙烯酰胺凝胶电泳溶液,置于用塑料膜封口的玻璃瓶中,日光经过瓶口照耀溶液,调查6周时刻内溶液中AM,NH4 + 和pH的改动。成果发现,一段时刻后溶液中单体AM显着添加,NH4 + 浓度降低,微生物浓度未见显着改动。阐明聚丙烯酰胺凝胶电泳链在环境条件下发作了割裂,判断降解的首要原因是光致裂解,而非生物降解。聚丙烯酰胺凝胶电泳的光致降解能够用键能的巨细来解说:聚丙烯酰胺凝胶电泳中C-C,C-H,C-N键的键能分别为340 kJ/mol,420 kJ/mol和414 kJ/mol,因而相应地要开裂这些键所对应的波长分别为325 nm,250 nm和288 nm。但因为臭氧层的存在,吸收了286 nm~300 nm的悉数辐射,因而太阳辐射只能使C-C键开裂,而对C-H和C-N键影响很小。

4、热降解  

    热降解是聚丙烯酰胺凝胶电泳在热效果下化学键的开裂,在升温进程中,聚合物发作了水解反响,其水解程度逐渐添加,然后反响趋向于安稳。在室温条件下,聚丙烯酰胺凝胶电泳水溶液比较安稳,但是,温文地升温就会呈现显着的聚合物降解景象。试验成果标明,在50 ℃时聚丙烯酰胺凝胶电泳水溶液的粘度随时刻的添加发作显着降低,这种粘度降低的趋势随温度添加大大加速,不一样温度条件下溶液粘度降低的半衰期(即粘度保存率到达一半的老化时刻)分别为117 h(50 ℃)、20 h(70 ℃)和2.6 h(90 ℃)。因为聚丙烯酰胺凝胶电泳首要以水溶液的方式被使用,因而对固态聚丙烯酰胺凝胶电泳的热降解性的重视较少。现在已有的文献中,对固态聚丙烯酰胺凝胶电泳热降解性的研讨首要是使用热重剖析和微分扫描量热的办法,依据不一样升温速率下PAM的失重曲线判断聚丙烯酰胺凝胶电泳的降解机理。


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